蛋白定量试剂盒
Bradford法蛋白定量是基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。
方案一、试管检测
1、试剂准备
(1)取适量5mg/ml蛋白标准,PBS稀释至终浓度为2mg/ml蛋白标准。配制后可立即使用,也可以-20°C长期保存。
(2)稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
3)取干净的试管,将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
(4)取干净的试管,分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个样品做2-3个平行反应。
2、样品孵育及检测
(1)向上一步骤配制的不同浓度的标准品BSA和待测样品试管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量试剂,充分混匀,室温放置10分钟。
(2)用分光光度计测定595nm处的吸光值。
3、制作标准曲线和计算样品浓度
(1)利用Excel或其他软件绘制标准曲线,并计算样品中的蛋白浓度。
(2)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
https://www.chem17.com/st325538/product_35639777.html
http://www.life-ilab.com.cn/SonList-2180922.html
蛋白定量试剂盒